一、防腐剂山梨酸钾对蚕豆根尖细胞的遗传毒性（论文文献综述）
姚宇[1]（2020）在《污水厂出水溶解性有机物的分子量分级表征及自然光解特性》文中进行了进一步梳理溶解性有机物（DOM）占污水厂出水总有机物的90%以上,其成分多样、性质复杂,是污水厂出水中的重要组成部分。随污水厂出水排放至受纳水体后,自然光照等环境因素会对DOM的组成成分、生物有效性以及毒性产生重要影响。本研究以西安市三个典型污水厂出水的DOM为研究对象,建立并优化了DOM的浓缩富集方法;利用固相萃取技术（SPE）以及超滤离心分级技术（UFC）,探讨了污水厂出水中不同分子量大小DOM的分布特征、理化光学特征、发光菌急性毒性及SOS/umu遗传毒性的特征;结合DOM的分子量分级和光致活性物种（RPS）的掩蔽,探讨了自然光照下污水厂出水DOM的生物毒性变化特征。本研究基于固相萃取技术,建立并优化了污水厂出水DOM的浓缩富集方法。优化内容主要包括污水水样预处理方法、固相萃取柱活化洗脱溶剂的种类以及DOM助溶剂的种类,并以总有机碳（TOC）,不饱和化合物（UV254）和荧光溶解有机物（FDOM）的回收率作为评价指标。实验表明,建立的方法可实现污水厂出水中DOM的总有机碳回收率为81.9%、不饱和化合物的回收率为91.7%、荧光类物质的回收率为66.7%。污水厂出水DOM分子量分布的研究表明,小于3kDa分子量的DOM占总DOM的80%95%、小于3kDa分子量的不饱和化合物占总不饱和化合物的85%95%、小于3kDa分子量的荧光溶解有机物占总荧光溶解有机物的75%95%、其中腐殖酸类荧光溶解有机物占总荧光溶解有机物的63.9%;利用建立的SPE方法和UFC技术,对污水厂出水DOM中的生物毒性进行分析,结果表明大分子DOM（10kDa0.45μm）的遗传毒性和急性毒性分别占总DOM毒性的48.4%和50.2%,并且与其他分子量区间的DOM比较而言,其单位有机碳遗传毒性和急性毒性最大;进一步进行相关性分析,发现芳香类有机物和荧光类有机物对DOM的遗传毒性影响较大,总有机碳含量和不饱和化合物对DOM的急性毒性影响较大。经固相萃取后的污水厂出水中,DOM的遗传毒性和急性毒性在模拟自然光照条件下呈现出不同的变化趋势:随着光照时间增加,遗传毒性呈现下降趋势,并且1kDa3kDa分子量DOM遗传毒性减少最多;相反,急性毒性呈现上升趋势。进一步研究发现,模拟自然光照条件下,掩蔽单线态氧（1O2）会减慢DOM遗传毒性减小的速度,加快急性毒性增大的速度;掩蔽羟基自由基（·OH）会加快DOM遗传毒性减小的速度,加快急性毒性增大的速度;掩蔽三线态DOM（3DOM*）对DOM遗传毒性减小的速度影响较小,但会加快急性毒性增大的速度。
张丽颖[2]（2020）在《山梨酸钾和糖精钠联合对小鼠小肠细胞生长发育的影响》文中研究表明食品添加剂安全评估标准建立在单一的食品添加剂的毒性效应基础上,然而在食品工业中,一种食品常常包含几种食品添加剂。多种食品添加剂一同在人体内则可能产生相加、协同、拮抗等联合作用,这对传统食品毒理学及食品添加剂的毒性评估提出了新的挑战。本论文采用了Caco-2细胞模型和mini-gut肠道类器官模型,对食品工业常见的食品添加剂联合应用的毒性进行了评价,主要研究内容及结果如下:（1）首先以Caco-2细胞模型,分别研究评价了山梨酸钾、亚硫酸钠、焦亚硫酸钠、苯甲酸钠和脱氢乙酸钠这五种食品防腐剂以及糖精钠、三氯蔗糖、安赛蜜、甜蜜素和阿斯巴甜这五种人工甜味剂对细胞增殖活力的影响。结果表明,它们的细胞增殖抑制毒性,都表现出剂量正相关性。毒性作用顺序分别为:焦亚硫酸钠>亚硫酸钠>山梨酸钾>脱氢乙酸钠>苯钾酸钠,糖精钠>安赛蜜>阿斯巴甜>甜蜜素>三氯蔗糖。选择了食品工业中较常用的山梨酸钾和糖精钠这两种食品添加剂进行联合实验,利用MTT法及2×2析因分析法发现对细胞增殖活力的毒性是协同联合作用,并利用高内涵分析系统及qPCR技术,发现山梨酸钾和糖精钠联合组能显着减少细胞数量,增加活性氧释放量,其中山梨酸钾组、糖精钠组和联合组坏死细胞的荧光强度分别为125.72±7.35%、130.11±2.82%、176.41±8.54%,ROS总荧光强度分别是161.51%±7.47%、144.16%±2.83%、196.60%±6.91%。并且增加细胞膜通透性和降低线粒体膜电位,高表达Bax、Caspase-3、Caspase-12、P53、Cytochrome的mRNA水平,低表达Bcl-2的mRNA水平。同时利用具有拮抗联合作用的亚硫酸钠和甜蜜素进行对比验证。（2）以mini-gut细胞模型为基础对这十种食品添加剂的毒性进行探究,发现它们不同程度的降低了mini-gut的面积增长率、出芽率、出芽数和细胞活性,其中山梨酸钾、亚硫酸钠、脱氢乙酸钠、三氯蔗糖、安赛蜜、甜蜜素和阿斯巴甜对mini-gut的细胞活力抑制毒性都有比较明显的剂量正相关性,随着剂量的增大细胞活力降低。对mini-gut的形态及一些生物学特征观察和细胞活性进行检测,发现山梨酸钾和糖精钠联合组能够显着抑制mini-gut的生长。山梨酸钾和糖精钠、亚硫酸钠和甜蜜素能够影响mini-gut细胞的分化,使得干细胞增多、内分泌细胞降低、吸收细胞增多。Mini-gut的氧化应激水平也发生变化,其中超氧化物歧化酶活性减小、谷胱甘肽过氧化物酶的活性也降低。同时通过qPCR检测得出Bcl-2l11、caspase-3、Fas的mRNA表达显着升高,氧化应激通路可能也是食品添加剂影响mini-gut生长的信号通路。其中山梨酸钾和糖精钠联合后有协同作用,亚硫酸钠和甜蜜素联合作用后可能是拮抗作用。本研究表明,基于肠道类器官的mini-gut是一种很好的评价食品添加剂毒性尤其是联合作用的理想模型。山梨酸钾和糖精钠单独及联合作用对肠道细胞会产生细胞毒性,诱导细胞凋亡。其中山梨酸钾和糖精钠联合作用是表现为协同毒性作用,亚硫酸钠和甜蜜素联合作用时表现为拮抗毒性作用。
谷炎培[3]（2017）在《基于HepG2细胞的食品添加剂联合作用及机理研究》文中提出食品添加剂广泛应用在食品生产加工的各个环节中,而作为一类天然或合成的化合物,其安全性也一直被人们普遍关注。国家食品添加剂使用标准GB2760-2014核准使用的食品添加剂都是经过了系统毒理学安全性分析和危害风险评估才被允许使用的,按规定标准使用量添加即能保障食品安全。目前,国家食品添加剂安全评估标准是基于单一食品添加剂的毒性效应建立起来的,而现实生活中一种食品常常包含两种及以上食品添加剂联合使用,且人们每天摄入的食品种类繁多,单一食品添加剂在规定的使用范围内是安全的,而多种食品添加剂同时使用时可能产生相加、协同、拮抗等联合作用,这就对传统食品毒理学理论及食品添加剂的危害风险评估提出了新的挑战。本论文采用HepG2细胞株,使用CCK-8法检测通常在食品中大量使用的防腐剂亚硫酸钠、焦亚硫酸钠及偶氮类人工合成色素日落黄、诱惑红、柠檬黄、赤藓红、胭脂红对细胞增殖活力的影响,从中选出对细胞抑制能力较大的日落黄及亚硫酸钠进行后续联合试验的研究;然后用CCK-8法及2×2析因设计方差分析模型对细胞增殖活力指标进行联合评价,高内涵分析（HCA）技术按效应相加模型进行单独及联合作用的多参数细胞毒性（细胞数量、膜通透性、活性氧释放量、死活比率、DNA损伤）研究;同时选取防腐剂山梨酸钾及抗氧化剂D-异抗坏血酸钠进行平行验证试验。接着运用HCA对日落黄与亚硫酸钠、山梨酸钾与D-异抗坏血酸钠单独及联合作用的多参数细胞凋亡指标（Caspase-3/7、钙离子浓度、线粒体膜电位）和细胞周期进行研究,对其诱发的凋亡机制进行初步分析。最后运用实时荧光定量PCR和Western印迹法对日落黄与亚硫酸钠、山梨酸钾与D-异抗坏血酸钠单独及联合作用后细胞的Caspase-3、Bax、Bcl-2、p53、Caspase-12基因与蛋白的表达量进行分析进一步确定凋亡的通路。通过上述试验对食品添加剂单独及联合作用的相关生物学指标进行分析,研究其联合作用方式,并对作用机理进行探索;为食品添加剂的使用标准制定提供参考依据,主要结果及结论如下:几种食品添加剂单独作用均呈剂量相关性的抑制HepG2细胞增殖,抑制能力大小为:亚硫酸钠>焦亚硫酸钠,日落黄>胭脂红>柠檬黄>诱惑红>赤藓红,其中亚硫酸钠及日落黄作用24 h的IC50大小分别为1.06±0.07 g/L和0.30±0.02 g/L;山梨酸钾及D-异抗坏血酸钠均呈时间及剂量正相关抑制增殖,其24h的IC50大小分别为1.35±0.11 g/L和1.58±0.17 g/L,按照析因方差设计分析联合作用类型表现为协同作用。日落黄与亚硫酸钠、山梨酸钾与D-异抗坏血酸钠单独及联合使用均会显着减少细胞数量,并且增加细胞膜通透性、死活比率及活性氧的释放量,均表现出剂量相关性;与单独组相比,按照效应相加模型评价均表现为协同作用。低、中剂量的处理组均未发现DNA损伤现象。日落黄与亚硫酸钠、山梨酸钾与D-异抗坏血酸钠单独及联合使用会导致HepG2细胞中Caspase-3/7蛋白及钙离子浓度显着上升,线粒体膜电位显着下降,三种指标均呈现剂量相关性,联合作用类型表现为协同;并且还发现这几种化合物都诱导HepG2细胞发生了细胞周期阻滞,不同剂量诱导产生不同的周期阻滞,单独组主要将周期阻滞在G0/G1和S期;联合组则表现为G0/G1期阻滞。实时荧光定量PCR和Western印迹法检测结果显示日落黄与亚硫酸钠、山梨酸钾与D-异抗坏血酸钠单独及联合使用时均可通过显着提高Caspase-3、Bax、P53基因的表达,同时显着降低Bcl-2的表达来诱导调亡的发生;而Caspase-12基因无明显的变化。上述实验表明日落黄与亚硫酸钠、山梨酸钾与D-异抗坏血酸钠单独及联合作用均会对HepG2细胞产生多参数细胞毒性,并诱导细胞凋亡,且高剂量使用具有一定的遗传毒性。综上所述,日落黄、亚硫酸钠与山梨酸钾、D-异抗坏血酸钠联合作用于HepG2细胞时均表现为协同作用;主要通过线粒体凋亡通路诱导细胞凋亡。
谷炎培,曲道峰,冯立芳,董雨婷,韩剑众[4]（2016）在《山梨酸钾和D-异抗坏血酸钠联合作用HepG2细胞的生物学效应分析》文中研究指明该文研究食品添加剂联合作用人肝癌HepG2细胞后的多参数生物学指标,并探索可能存在的损伤机制。CCK-8法检测受试物山梨酸钾及D-异抗坏血酸钠0.132.00 g/L分别作用HepG2细胞24、48及72 h后的细胞增殖活力,显示山梨酸钾及D-异抗坏血酸钠均呈显着的时间、剂量依赖性的抑制HepG2细胞增殖,其24 h的IC50分别为1.35±0.11 g/L和1.58±0.17 g/L。高内涵分析结果表明,与单独组相比,联合组显着降低细胞数量和线粒体膜电位,增大细胞膜通透性及活性氧水平（P<0.05）;高剂量联合组（0.30+0.41 g/L）显着增加DNA损伤（P<0.01）,表现为协同作用。qRT-PCR和Western印迹法显示,山梨酸钾及D-异抗坏血酸钠可显着提高P53、Caspase-3、Bax、γ-H2AX表达,同时显着降低Bcl-2表达,从而抑制HepG2细胞增殖。
商桑,王健,丁晓雯[5]（2015）在《赤霉素GA3急性毒性和遗传毒性》文中进行了进一步梳理目的:研究赤霉素GA3的急性毒性和遗传毒性,为合理使用赤霉素以及赤霉素残留限量标准的制定提供参考。方法:采用最大剂量耐受法测定赤霉素GA3的急性毒性,采用蚕豆根尖细胞微核实验、小鼠骨髓细胞微核实验和小鼠精子畸形实验测定赤霉素GA3的遗传毒性。结果:给昆明种小鼠经口灌胃赤霉素GA3,LD50>15 000 mg/kg;赤霉素GA3在质量浓度为0.12.0 mg/L范围内时,蚕豆根尖细胞微核率呈上升趋势,与阴性对照组相比均存在极显着差异,且微核指数均>1.5;7.5 g/kg赤霉素GA3对雌、雄小鼠的骨髓细胞微核率分别为7.47‰、7.07‰,小鼠精子畸形率为5.47%,与阴性对照组相比均存在极显着差异（P<0.01）。结论:赤霉素GA3的急性毒性虽然比较低,属于无毒级,但是在较高剂量条件下对植物细胞、动物的体细胞与生殖细胞均具有遗传毒性,应尽快制定赤霉素GA3使用限量标准。
胡春红,纪秀娥,李淑梅,古红梅,周琳[6]（2014）在《复合防腐剂浸种对玉米种子萌发及幼苗生长的影响》文中进行了进一步梳理采用改良土培法,研究不同质量浓度的复合防腐剂（苯甲酸钠和山梨酸钾质量比为3∶2）浸种对玉米种子萌发及幼苗生长的影响。结果表明,低浓度的复合防腐剂（≤3.0 g/L）处理,种子的发芽率、幼苗的根长、株高、株直茎、叶绿素及过氧化物酶指标均增高,丙二醛（MDA）含量降低;高浓度时（≥6.0 g/L）上述形态与生理指标均发生反向改变,当浓度为9.0 g/L时,各指标变化情况与对照组相比,差异均达到显着或极显着水平。综上所述,复合防腐剂对玉米幼苗的生长起低浓度促进、高浓度抑制的作用。
胡春红,刘中华,郭婕,纪秀娥,党柯柯[7]（2014）在《苯甲酸钠和山梨酸钾浸种对玉米幼苗生长发育的影响》文中提出采用土培法研究不同浓度的苯甲酸钠、山梨酸钾对玉米幼苗生长发育的影响,初步探讨食品防腐剂可能对作物生长造成的危害。结果显示:当浓度为2.0g/L时,两种防腐剂对玉米幼苗生长发育均呈现促进作用;随着浓度增加,两种防腐剂对幼苗的生长均呈现抑制作用,当浓度为8.0g/L时,抑制作用达到差异显着水平。总之,两种防腐剂对玉米幼苗的生长表现为低浓度促进,高浓度抑制现象;抑制玉米幼苗生长的警示浓度均为8.0 g/L;相同浓度下,山梨酸钾的抑制作用强于苯甲酸钠。
胡春红,师杨,周琳,李季平,王红星[8]（2014）在《复合防腐剂胁迫下玉米幼苗对外源水杨酸处理的响应》文中研究表明采用改良土培法研究不同浓度水杨酸（SA）对复合防腐剂（苯甲酸钠和山梨酸钾）胁迫下玉米"豫玉23"品种出苗及幼苗生长的影响。结果表明,防腐剂处理下玉米出苗延迟,幼苗矮化而纤弱,叶绿素（Chl.）含量、过氧化物酶（POD）及超氧化物歧化酶（SOD）活力降低,脯氨酸（Pro）及丙二醛（MDA）含量升高,说明防腐剂对玉米种子萌发及幼苗生长均具有抑制和毒害作用。而外源SA则缓解了防腐剂对玉米幼苗的伤害。当SA浓度0.020g·L-1时,缓解作用随浓度升高而增强;当SA浓度>0.020g·L-1时,缓解作用降低。SA对玉米种子萌发的最佳浓度为0.005g·L-1,对玉米幼苗生长的最佳浓度为0.020g·L-1.
胡春红,郭婕,陈龙,李季平,乔琳,何乐[9]（2014）在《防腐剂胁迫下外源芸苔素内酯对玉米幼苗生长及抗性的影响》文中认为采用改良土培法,研究防腐剂胁迫下玉米幼苗对不同浓度芸苔素内酯处理的响应,探索外源芸苔素内酯缓解防腐剂对玉米胁迫的适宜浓度。结果表明:10.0 g/L复合防腐剂（苯甲酸钠、山梨酸钾的质量比为2∶3）显着抑制玉米幼苗生长发育,玉米出苗延迟,植株矮化,叶绿素含量、根系活力均降低,膜过氧化加剧;适宜浓度芸苔素内酯处理能提高玉米幼苗的抗性,缓解复合防腐剂的胁迫,且以质量浓度0.12 mg/L芸苔素内酯处理的效果最佳。
胡春红,刘坤,王红星,李俐俐,纪秀娥[10]（2013）在《外源水杨酸缓解复合防腐剂对小麦幼苗生长的胁迫效应研究》文中研究说明采用土培法对外源水杨酸（SA）与不同质量浓度的复合防腐剂（苯甲酸钠和山梨酸钾）对小麦种子萌发及幼苗生长的影响进行研究,初步探讨水杨酸缓解土壤防腐剂污染对小麦生长的抑制效应.试验结果表明:0.01g/L水杨酸可缓解或解除低浓度复合防腐剂（≤5g/L）对小麦萌发和幼苗生长的抑制作用;在高浓度复合防腐剂（质量浓度>5g/L）胁迫下,水杨酸对其的缓解作用减弱,甚至随防腐剂浓度增加呈负面效应,增强防腐剂对小麦幼苗的胁迫作用.
二、防腐剂山梨酸钾对蚕豆根尖细胞的遗传毒性（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、防腐剂山梨酸钾对蚕豆根尖细胞的遗传毒性（论文提纲范文）
（1）污水厂出水溶解性有机物的分子量分级表征及自然光解特性（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 1.绪论 |
| 1.1 研究背景 |
| 1.1.1 城市污水厂出水中的溶解性有机物 |
| 1.1.2 溶解性有机污染物的毒性 |
| 1.2 生物毒性检测技术 |
| 1.2.1 遗传毒性检测 |
| 1.2.2 急性毒性检测 |
| 1.2.3 内分泌干扰毒性检测 |
| 1.3 溶解性有机污染物的分级方法 |
| 1.3.1 按分子量大小分级 |
| 1.3.2 按亲疏水性分级 |
| 1.4 自然光照对溶解性有机物的影响 |
| 1.4.1 DOM的光降解 |
| 1.4.2 光致活性物种对自然光解的影响 |
| 1.5 本课题的研究内容及意义 |
| 1.5.1 研究内容 |
| 1.5.2 选题意义 |
| 1.5.3 技术路线 |
| 2.材料与方法 |
| 2.1 仪器设备与材料 |
| 2.2 水样的采集与预处理 |
| 2.3 固相萃取方法 |
| 2.4 分子量分级方法 |
| 2.5 模拟自然光照实验 |
| 2.6 理化及光学分析方法 |
| 2.6.1 溶解性有机物的浓度表征(TOC) |
| 2.6.2 紫外可见光谱表征(UV-vis) |
| 2.6.3 三维荧光光谱表征(EEMs) |
| 2.7 生物毒性检测方法 |
| 2.7.1 遗传毒性检测方法 |
| 2.7.2 急性毒性检测方法 |
| 3.溶解性有机物浓缩富集方法的构建 |
| 3.1 水样的处理 |
| 3.1.1 水样预处理方法 |
| 3.1.2 总有机碳和不饱和化合物回收率的比较 |
| 3.1.3 荧光类物质回收率的比较 |
| 3.2 固相萃取浓缩富集过程的优化 |
| 3.2.1 固相萃取柱的选择 |
| 3.2.2 活化洗脱溶剂的选择 |
| 3.2.3 DOM助溶剂的选择 |
| 3.3 小结 |
| 4.污水厂出水中DOM的分子量分级表征及生物毒性特征 |
| 4.1 不同分子量DOM的理化及光学特征 |
| 4.1.1 总有机碳含量分析 |
| 4.1.2 紫外可见吸收光谱分析 |
| 4.1.3 三维荧光光谱分析 |
| 4.2 不同分子量DOM的生物毒性特征 |
| 4.2.1 遗传毒性特征 |
| 4.2.2 急性毒性特征 |
| 4.3 物化指标与生物毒性指标的相关性分析 |
| 4.4 小结 |
| 5.模拟自然光照下DOM的理化及生物毒性特征 |
| 5.1 DOM的理化及光学特征 |
| 5.1.1 总有机碳含量及紫外可见吸收光谱分析 |
| 5.1.2 三维荧光光谱分析 |
| 5.2 DOM的生物毒性特征 |
| 5.2.1 遗传毒性变化特征 |
| 5.2.2 急性毒性变化特征 |
| 5.2.3 荧光类物质与生物毒性的相关性 |
| 5.3 光致活性物种对生物毒性变化的影响 |
| 5.3.1 对遗传毒性的影响 |
| 5.3.2 对急性毒性的影响 |
| 5.4 小结 |
| 6.结论 |
| 7.创新点 |
| 8.致谢 |
| 9.参考文献 |
（2）山梨酸钾和糖精钠联合对小鼠小肠细胞生长发育的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 引言 |
| 1.1 食品添加剂的使用及研究现状 |
| 1.1.1 常用的食品防腐剂的使用及研究现状 |
| 1.1.2 常用人工甜味剂的使用及研究现状 |
| 1.2 食品添加剂的安全性评价方法和研究现状 |
| 1.2.1 传统的食品添加剂安全性评价方法 |
| 1.2.2 细胞学安全性评价研究现状 |
| 1.2.3 食品添加剂联合作用的类型和评价方法 |
| 1.3 Mini-gut细胞模型研究现状 |
| 1.4 研究目的及内容 |
| 1.4.1 研究目的 |
| 1.4.2 实验技术路线 |
| 1.4.3 研究内容 |
| 2 不同防腐剂和人工甜味剂单独及联合作用对Caco-2 细胞生长的影响 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料及仪器 |
| 2.2.1 主要实验材料与试剂 |
| 2.2.2 实验仪器与设备 |
| 2.2.3 实验试剂的配制 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 细胞培养常规操作 |
| 2.3.2 实验设计 |
| 2.3.3 MTT法检测细胞增殖活力 |
| 2.3.4 食品添加剂单独及联合作用的HCA多参数分析 |
| 2.3.5 食品添加剂单独及联合作用致细胞凋亡的通路探究 |
| 2.3.6 统计处理 |
| 2.4 结果与讨论 |
| 2.4.1 5 种防腐剂和5种人工甜味剂对细胞活力的影响 |
| 2.4.2 山梨酸钾和糖精钠单独及联合作用的多指标评价 |
| 2.4.3 亚硫酸钠和甜蜜素单独及联合作用的多指标评价 |
| 2.5 小结 |
| 3 不同防腐剂和人工甜味剂单独及联合作用对mini-gut生长的影响 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料及仪器 |
| 3.2.1 主要实验材料与试剂 |
| 3.2.2 实验试剂的配制 |
| 3.2.3 实验仪器与设备 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 小肠隐窝的分离与培养 |
| 3.3.2 小肠类器官的传代 |
| 3.3.3 小肠类器官的冻存 |
| 3.3.4 实验设计 |
| 3.3.5 MTT法对mini-gut细胞活力的测定 |
| 3.3.6 不同防腐剂及人工甜味剂对mini-gut生长的影响 |
| 3.3.7 不同防腐剂联合人工甜味剂对mini-gut生长的影响 |
| 3.3.8 统计处理 |
| 3.4 结果与讨论 |
| 3.4.1 五种常见的防腐剂对Mini-gut生长的影响 |
| 3.4.2 五种常见的人工甜味剂对Mini-gut生长的影响 |
| 3.4.3 防腐剂和人工甜味剂联合作用对Mini-gut生长发育的影响 |
| 3.5 小结 |
| 4 山梨酸钾和糖精钠单独及联合作用对肠道细胞增殖分化的影响 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料及仪器 |
| 4.2.1 主要实验材料与试剂 |
| 4.2.2 实验试剂的配制 |
| 4.2.3 仪器与设备 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.3.1 小肠隐窝的分离与培养 |
| 4.3.2 小肠类器官的传代 |
| 4.3.3 实验设计 |
| 4.3.4 Ed U细胞增殖检测 |
| 4.3.5 细胞总蛋白提取及蛋白含量检测 |
| 4.3.6 总SOD活性检测 |
| 4.3.7 总谷胱甘肽过氧化物酶检测 |
| 4.3.8 实时荧光PCR检测 |
| 4.3.9 统计处理 |
| 4.4 结果与讨论 |
| 4.4.1 山梨酸钾和糖精钠对Mini-gut生长的影响 |
| 4.4.2 山梨酸钾和糖精钠对Mini-gut细胞分化的影响 |
| 4.4.3 山梨酸钾和糖精钠对mini-gut的氧化应激分析 |
| 4.4.4 亚硫酸钠和甜蜜素对mini-gut生长的影响 |
| 4.4.5 亚硫酸钠和甜蜜素对mini-gut细胞分化的影响 |
| 4.4.6 亚硫酸钠和甜蜜素对mini-gut的氧化应激分析 |
| 4.4.7 食品添加剂促进mini-gut损伤和凋亡的相关通路探究 |
| 4.5 小结 |
| 5 总结与展望 |
| 5.1 总结 |
| 5.2 创新点 |
| 5.3 展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（3）基于HepG2细胞的食品添加剂联合作用及机理研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 食品添加剂的使用及研究现状 |
| 1.2 常用食品添加剂概述 |
| 1.2.1 合成色素 |
| 1.2.2 防腐剂和抗氧化剂 |
| 1.3 食品添加剂检测技术的发展 |
| 1.4 联合作用的分类及评价方法 |
| 1.4.1 联合作用的分类 |
| 1.4.2 联合作用的评价方法 |
| 1.5 细胞毒性概述 |
| 1.5.1 细胞坏死 |
| 1.5.2 细胞凋亡 |
| 1.6 立题背景及意义 |
| 第2章 食品添加剂单独及联合作用对HepG2细胞多参数毒性的影响 |
| 2.1 引言 |
| 2.1.1 CCK-8法简介 |
| 2.1.2 高内涵分析技术简介 |
| 2.2 材料及仪器 |
| 2.2.1 主要实验材料与试剂 |
| 2.2.2 实验仪器与设备 |
| 2.2.3 实验试剂的配置 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 细胞培养常规操作 |
| 2.3.2 CCK-8法检测细胞增殖活力 |
| 2.3.3 食品添加剂单独及联合作用的多指标细胞毒性分析 |
| 2.4 统计处理 |
| 2.5 结果与分析 |
| 2.5.1 2种防腐剂和5种色素对细胞活力的影响 |
| 2.5.2 亚硫酸钠与日落黄联合作用的多指标评价 |
| 2.5.3 山梨酸钾及D-异抗坏血酸钠对细胞增殖抑制率的影响 |
| 2.5.4 山梨酸钾与D-异抗坏血酸钠联合作用的多指标评价 |
| 2.6 小结与讨论 |
| 第3章 食品添加剂单独及联合作用对HepG2细胞凋亡和周期的影响 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料及仪器 |
| 3.2.1 主要实验材料与试剂 |
| 3.2.2 实验仪器与设备 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 细胞培养常规操作 |
| 3.3.2 细胞凋亡的检测 |
| 3.3.3 细胞周期的检测 |
| 3.4 统计处理 |
| 3.5 结果与分析 |
| 3.5.1 日落黄与亚硫酸钠结果分析 |
| 3.5.2 山梨酸钾与D-异抗坏血酸钠结果分析 |
| 3.6 小结与讨论 |
| 第4章 食品添加剂单独及联合作用对HepG2细胞基因与蛋白的影响 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料及仪器 |
| 4.2.1 主要实验材料与试剂 |
| 4.2.2 实验仪器与设备 |
| 4.2.3 实验试剂的配置 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.3.1 细胞培养常规操作 |
| 4.3.2 实时荧光定量PCR检测目的基因mRNA水平的表达 |
| 4.3.3 Western印迹法检测目的基因蛋白水平的表达 |
| 4.4 统计处理 |
| 4.5 结果与分析 |
| 4.5.1 亚硫酸钠与日落黄结果分析 |
| 4.5.2 山梨酸钾与D-异抗坏血酸钠结果分析 |
| 4.6 小结与讨论 |
| 第5章 总结与展望 |
| 5.1 总结 |
| 5.2 创新点 |
| 5.3 存在的问题与展望 |
| 参考文献 |
| 研究生期间发表论文 |
| 致谢 |
（4）山梨酸钾和D-异抗坏血酸钠联合作用HepG2细胞的生物学效应分析（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 细胞培养 |
| 1.3 CCK-8法检测细胞增殖抑制率 |
| 1.4 联合作用评价方法 |
| 1.5 多参数细胞毒性检测 |
| 1.6 氧化应激检测 |
| 1.7 DNA损伤检测 |
| 1.8 实时荧光定量PCR |
| 1.9 蛋白免疫印迹实验 |
| 1.1 0 数据统计处理 |
| 2 结果 |
| 2.1 山梨酸钾和D-异抗坏血酸钠抑制细胞增殖 |
| 2.2 山梨酸钾和D-异抗坏血酸钠对Hep G2细胞的毒性作用具有协同效应 |
| 2.3 山梨酸钾和D-异抗坏血酸钠协同促进Hep G2细胞氧化应激水平升高 |
| 2.4 不同剂量山梨酸钾和D-异抗坏血酸钠联合对Hep G2细胞的DNA损伤程度不同 |
| 2.5 山梨酸钾和D-异抗坏血酸钠对Hep G2细胞相关目的基因及蛋白的检测 |
| 3 讨论 |
（5）赤霉素GA3急性毒性和遗传毒性（论文提纲范文）
| 1材料与方法 |
| 1.1材料、动物与试剂 |
| 1.2仪器与设备 |
| 1.3方法 |
| 1.3.1急性毒性实验[4] |
| 1.3.2蚕豆根尖细胞微核实验[5] |
| 1.3.3小鼠骨髓细胞微核实验[7] |
| 1.3.4小鼠精子畸形实验[8] |
| 1.4数据统计分析 |
| 2结果与分析 |
| 2.1急性毒性实验结果 |
| 2.2蚕豆根尖细胞微核实验结果 |
| 2.3小鼠骨髓细胞微核实验结果 |
| 2.4小鼠精子畸形实验结果 |
| 3结论与讨论 |
（6）复合防腐剂浸种对玉米种子萌发及幼苗生长的影响（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料处理 |
| 1.2 指标测定方法 |
| 1.3 数据统计方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 复合防腐剂浸种对玉米种子发芽及幼苗形态指标的影响 |
| 2.2 复合防腐剂浸种对玉米幼苗生理指标的影响 |
| 3 小结与讨论 |
（7）苯甲酸钠和山梨酸钾浸种对玉米幼苗生长发育的影响（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料和设备 |
| 1.2 材料处理 |
| 1.3 出苗情况测定 |
| 1.4 数据分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 两种防腐剂对玉米出苗情况的影响 |
| 2.2 两种防腐剂对玉米幼苗形态指标的影响 |
| 2.3 不同浓度防腐剂对玉米幼苗生理指标的影响 |
| 2.3.1 对Chl.含量的影响 |
| 2.3.2对POD酶活力的影响 |
| 3讨论与结论 |
（8）复合防腐剂胁迫下玉米幼苗对外源水杨酸处理的响应（论文提纲范文）
| 1 材料和方法 |
| 1.1 改良培养土 |
| 1.2 实验材料处理 |
| 1.3 各指标测定方法 |
| 1.4 数据分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 防腐剂胁迫下SA对玉米出苗情况的影响 |
| 2.2 防腐剂胁迫下SA对玉米幼苗形态指标的影响 |
| 2.2 防腐剂胁迫下SA对玉米幼苗叶片中各生理指标的影响 |
| 3 讨论与结论 |
（9）防腐剂胁迫下外源芸苔素内酯对玉米幼苗生长及抗性的影响（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 培养土改良 |
| 1.3 材料培养与处理 |
| 1.4 测定指标与方法 |
| 1.5 数据分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 玉米出苗情况 |
| 2.2 玉米幼苗的形态指标 |
| 2.3 玉米叶片的生理指标 |
| 3 结论与讨论 |
（10）外源水杨酸缓解复合防腐剂对小麦幼苗生长的胁迫效应研究（论文提纲范文）
| 1 材料和方法 |
| 1.1 材料处理 |
| 1.2 种子萌发情况测定 |
| 1.3 幼苗形态指标和生理指标的测定 |
| 1.4 数据分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 复合防腐剂和水杨酸对小麦萌发及生长的影响 |
| 2.1.1 复合防腐剂和水杨酸对小麦种子萌发的影响 |
| 2.1.2 复合防腐剂和水杨酸相互作用对小麦幼苗形态指标的影响 |
| 2.2 复合防腐剂和水杨酸对小麦幼苗叶绿素含量的影响 |
| 3 讨论与结论 |
| 3.1 水杨酸与复合防腐剂作用下, 小麦种子萌发及生长变化分析 |
| 3.2 水杨酸与复合防腐剂作用下, 小麦叶片叶绿素含量变化分析 |
四、防腐剂山梨酸钾对蚕豆根尖细胞的遗传毒性（论文参考文献）
- [1]污水厂出水溶解性有机物的分子量分级表征及自然光解特性[D]. 姚宇. 西安建筑科技大学, 2020(01)
- [2]山梨酸钾和糖精钠联合对小鼠小肠细胞生长发育的影响[D]. 张丽颖. 浙江工商大学, 2020(05)
- [3]基于HepG2细胞的食品添加剂联合作用及机理研究[D]. 谷炎培. 浙江工商大学, 2017(06)
- [4]山梨酸钾和D-异抗坏血酸钠联合作用HepG2细胞的生物学效应分析[J]. 谷炎培,曲道峰,冯立芳,董雨婷,韩剑众. 中国生物化学与分子生物学报, 2016(11)
- [5]赤霉素GA3急性毒性和遗传毒性[J]. 商桑,王健,丁晓雯. 食品科学, 2015(17)
- [6]复合防腐剂浸种对玉米种子萌发及幼苗生长的影响[J]. 胡春红,纪秀娥,李淑梅,古红梅,周琳. 湖北农业科学, 2014(17)
- [7]苯甲酸钠和山梨酸钾浸种对玉米幼苗生长发育的影响[J]. 胡春红,刘中华,郭婕,纪秀娥,党柯柯. 吉林农业科学, 2014(03)
- [8]复合防腐剂胁迫下玉米幼苗对外源水杨酸处理的响应[J]. 胡春红,师杨,周琳,李季平,王红星. 河南师范大学学报(自然科学版), 2014(03)
- [9]防腐剂胁迫下外源芸苔素内酯对玉米幼苗生长及抗性的影响[J]. 胡春红,郭婕,陈龙,李季平,乔琳,何乐. 湖南农业大学学报(自然科学版), 2014(02)
- [10]外源水杨酸缓解复合防腐剂对小麦幼苗生长的胁迫效应研究[J]. 胡春红,刘坤,王红星,李俐俐,纪秀娥. 华中师范大学学报(自然科学版), 2013(03)